在植物生理研究和设施农业管理中,光合作用测定是一项非常重要的基础工作。一片叶子在不同光照强度下,光合速率如何变化?什么时候达到最大净光合速率?光照继续增强后,光合作用还会不会继续提高?叶片在什么光强下水分利用效率更高?
这些问题,都可以通过光响应曲线测定得到比较直观的答案。本次我们使用凡耕科技的FS-3080H光合作用测定仪,以烟草叶片为测试对象,设置连续光照梯度,完成了一组光响应曲线实测。测试完成后,将3080H结果文件中的原始数据复制到光合计算网站,即可直接获得饱和光强、光补偿点、暗呼吸速率、光抑制系数、光饱和系数、水分利用效率等参数,并生成拟合曲线。
一、测试对象与仪器
测试材料:生长状态正常、叶片展开充分的烟草叶片。

该系统可用于测定植物叶片净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、水分利用效率等参数,并支持光响应曲线测定。

二、光响应曲线如何设置?
在仪器中设置光响应曲线程序后,本次测试采用了20个光照梯度,光强范围覆盖低光、中光和高光条件。
本次设置的光强梯度包括:1800、1750、1700、1600、1500、1400、1200、1000、800、600、500、400、350、300、250、200、150、100、50、0 μmol·m⁻²·s⁻¹。

三、测量数据用于模型拟合
通过不同光强下连续测定光合速率,可以观察烟草叶片净光合速率和水分利用效率随光照变化的响应规律。
测试完成后,将结果文件中的光强和对应测定数据复制到光合计算网站,即可进行模型拟合。
1. 净光合速率 A
反映叶片固定CO₂的能力,是评价光合作用强弱的核心指标。反映叶片单位水分消耗所获得的碳固定收益,可以理解为“用掉一份水,换来多少光合产物"。
反映叶片单位气孔开放程度下的碳同化能力,可以理解为“气孔打开到这个程度,叶片能固定多少CO₂"。

四、净光合速率:光照增强后先升高,随后趋于饱和
从净光合速率响应曲线可以看出,烟草叶片的净光合速率随光照增强呈现明显的变化规律:低光阶段快速上升,中高光阶段趋于饱和,高光阶段略有下降。
在极低光强下,叶片净光合速率为负值。光强为1 μmol·m⁻²·s⁻¹时,净光合速率为 -0.66 μmol CO₂·m⁻²·s⁻¹,说明此时叶片呼吸消耗大于光合作用固定,整体表现为净释放CO₂。随着光强增加,净光合速率快速升高。当光强升至252 μmol·m⁻²·s⁻¹时,净光合速率达到3.24 μmol CO₂·m⁻²·s⁻¹,说明低光阶段光照是限制叶片光合作用的主要因素。当光强进一步升高至1001–1208 μmol·m⁻²·s⁻¹时,净光合速率接近zuigao水平。其中,在1208 μmol·m⁻²·s⁻¹光强下,实测净光合速率达到4.55 μmol CO₂·m⁻²·s⁻¹。继续升高光强后,净光合速率没有继续增加。光强为1394、1597和1904 μmol·m⁻²·s⁻¹时,净光合速率分别为4.51、4.46和4.18 μmol CO₂·m⁻²·s⁻¹,高光下出现了轻微下降趋势。

其中,饱和光强为1063.71 μmol·m⁻²·s⁻¹,说明本次测试条件下,烟草叶片在约1064 μmol·m⁻²·s⁻¹附近达到较高光合水平。
光补偿点为29.14 μmol·m⁻²·s⁻¹,说明当光强低于该值时,叶片呼吸消耗大于光合;当光强高于该值时,叶片才开始形成净碳积累。

五、瞬时水分利用效率:中等光强下更高效
瞬时水分利用效率反映的是叶片单位水分消耗所对应的碳固定能力。
从拟合曲线可以看出,烟草叶片瞬时水分利用效率呈单峰曲线,约在500 μmol·m⁻²·s⁻¹光强附近达到较高水平。低光强下,由于净光合速率过低,影响了水分利用效率。当光强逐渐增强后,WUEinst快速提高。在500 μmol·m⁻²·s⁻¹附近,实测WUEinst达到较高水平。但当光强继续升高后,WUEinst开始下降。说明在高光条件下,净光合速率维持在了稳定水平,光合速率不再随光强升高而升高,同时水分消耗的增加,导致了单位水分对应的碳固定效率下降。

结果表明,烟草叶片瞬时水分利用效率的最适光强约为 521.82 μmol·m⁻²·s⁻¹。
这意味着,如果试验目标是节水高效,中等光强条件下,叶片可能具有更好的水分利用效率。但最佳光合效率在不同物种之间差异很大,阴生植物最大光效曲线为300-500μmol·m⁻²·s⁻¹。而小麦玉米等高光合植物的最适光强则可能达到1500μmol·m⁻²·s⁻¹以上.

六、内禀水分利用效率:反映气孔调控与碳同化的协调性
内禀水分利用效率WUEi可以简单理解为:气孔打开到一定程度后,叶片能够固定多少CO₂。
本次测试中,烟草叶片WUEi同样表现出先升高后下降的趋势。在低光强下,叶片光合作用较弱,WUEi较低。随着光强增加,净光合速率提高,WUEi也随之升高。但在高光强下,WUEi没有继续增加,反而有所下降。这说明当光照过强时,叶片气孔开放与碳固定之间的协调性下降,继续增强光照并不能带来更高的气孔利用效率。

结果说明,烟草叶片在约 750.72 μmol·m⁻²·s⁻¹ 光强下,气孔调控与碳同化之间的配合较好。

七、三条曲线一起看:不是光越强越好
将净光合速率、瞬时水分利用效率和内禀水分利用效率放在一起比较,可以发现一个很重要的现象:烟草叶片最高净光合速率对应的光强,并不是水分利用效率zui高的光强。

这说明烟草叶片的光照需求具有不同层次:
如果目标是获得较高净光合速率,可参考 1000–1200 μmol·m⁻²·s⁻¹ 的光照范围。如果目标是兼顾光合效率和水分利用效率,则 500–800 μmol·m⁻²·s⁻¹ 可能更加合适。当光强继续升高到1500 μmol·m⁻²·s⁻¹以上时,净光合速率没有明显提高,水分利用效率反而下降,说明过高光强未必带来更好的综合效益。

八、FS-3080H的应用价值
本次烟草叶片光响应曲线测试说明,FS-3080H光合作用测定系统不仅可以完成叶片气体交换参数采集,还可以结合光合计算模型,实现从原始数据到关键参数输出的完整分析流程。
完成测定后,用户可以将FS-3080H结果文件中的数据复制到光合计算网站,快速获得:最大净光合速率、饱和光强、光补偿点、暗呼吸速率、光抑制系数、光饱和系数、瞬时水分利用效率zui适光强、内禀水分利用效率zui适光强以及拟合曲线。这使光合数据不再只是表格中的数字,而是可以进一步转化为具有生理意义的参数结果。
九、结语
通过本次烟草叶片实测可以看出,FS-3080H光合作用测定系统能够较好地完成光响应曲线测定,并结合模型拟合快速获得关键光合参数。
本次结果显示,烟草叶片净光合速率随光强增加呈现先快速升高、后趋于饱和并轻微下降的趋势。模型拟合得到最大净光合速率为4.50671 μmol CO₂·m⁻²·s⁻¹,饱和光强为1063.71 μmol·m⁻²·s⁻¹,光补偿点为29.14 μmol·m⁻²·s⁻¹。同时,烟草叶片瞬时水分利用效率和内禀水分利用效率均在中等光强范围内达到较优水平,说明植物叶片并不是光照越强越高效。对于科研测试和生产管理而言,光响应曲线不仅可以告诉我们植物“能不能光合",还可以进一步告诉我们植物“在什么光强下更高效"。FS-3080H,让光合测定更直观,让数据分析更高效。