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叶绿素仪有关叶绿素a的测定过程概述
点击次数:429 发布时间:2022-05-17
   叶绿素仪是通过两种光来检测叶绿素含量的,在两个不同波长区域,叶绿素对光吸收是不相同的,在这两个不同波长区域下,根据光通过叶片传输数量的不同进行叶绿素相对含量的计算。两个LED光源发射两种光,一种是红光,一种是红外线,两种光穿透叶片,打到接收器上,光信号转换成模拟信号,模拟信号被放大器放大,由模拟/数字转换器转换成数字信号,数字信号被微处理器处理,计算出叶绿素值并显示。
  有关叶绿素a的测定过程可能要用到分光光度计、天平、研钵、棕色容量瓶、小漏斗、定量滤纸、吸水纸、擦境纸、滴管等仪器。准备几片新鲜的植物叶片,准备96%的乙醇、石英砂和碳酸钙粉,具体操作步骤如下:
  取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料,擦净组织表面污物,去除中脉剪碎。称取剪碎的新鲜样品2g,放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及3mL95%乙醇,研成均浆,再加乙醇10mL,继续研磨至组织变白。静置3-5min。取滤纸1张置于漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗,滤液流至100mL棕色容量瓶中;用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,后连同残渣一起倒入漏斗中。用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。后用乙醇定容至100mL,摇匀。取叶绿体色素提取液在波长665nm、645nm和652nm下测定吸光度,以95%乙醇为空白对照。
  然后根据资料上提供的叶绿素a的计算方法,就可算出新鲜的植物叶片叶绿素a的含量。具体公式如下:
  叶绿素a=(12.7A665-2.69A645)·(V/1000W);
  叶绿素b=(12.7A645-2.69A665)·(V/1000W);
  总叶绿素a=(20.0A645+8.02A665)·(V/1000W)或总叶绿素a=(A652/34.5)·(V/1000W)。
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